O espermatozóide percorre após a sua deposição no sistema reprodutor feminino, uma sequência de compartimentos para alcançar o óvulo. Nesse trajeto ocorrem modificações na sua ultra estrutura (capacitação).

O teste hipoosmótico avalia a habilidade da membrana do espermatozóide ao atravessar os diferentes gradientes de concentração ao qual ele é exposto. Caso o HOS seja negativo, a membrana é quimicamente inativa, e não tem função no processo de fertilização. A membrana é importante não apenas na motilidade do espermatozóide, mas também na reação acrossômica (entrada do espermatozóide no óvulo).

No HOS são incubados espermatozóides sob condições hipoosmóticas. O transporte de água para a célula irá ocorrer quando a membrana for funcional, mostrando a cauda em forma de anel (inchaço). Isso ocorre porque a membrana ao redor da cauda é bastante permeável, permitindo então a entrada de água que irá causar distenção (ballooning) desta membrana. (Veja figura abaixo).

Este teste difere da coloração supra vital, pois neste é observada a capacidade funcional da membrana, independente se o espermatozóide está móvel ou imóvel, podendo estar normal, mesmo quando o espermatozóide não é viável.

O HOS é um importante complemento do espermograma na investigação da infertilidade porque os espermatozóides férteis têm um HOS normal. No esperma com alta incidência de HOS negativos (sem inchaço) há menor ocorrência de gravidez.

VALOR NORMAL : acima de 50% apresentando inchaço de cauda.